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    病毒是一種個體微小,結(jié)構(gòu)簡單,只含一種核酸(DNA或RNA),必須在活細胞內(nèi)寄生并以復制方式增殖的非細胞型生物。病毒滅活試驗是利用某種有代表性的活病毒及其細胞感染技術,評價各種消毒因子的病毒殺滅效果,驗證消毒因子的病毒滅活能力。
    病毒滅活是指用物理或化學手段殺死病毒,但是不損害它們體內(nèi)有用抗原的方法。滅活病毒,會使病容毒蛋白的結(jié)構(gòu)受到破壞,蛋白不再有生理活性,所以失去感染,致病和繁殖能力,但是常規(guī)的滅活不影響病毒蛋白的一級結(jié)構(gòu),意思就是病毒蛋白的序列沒有變化。免疫系統(tǒng)對抗原的識別分成兩種,一種是構(gòu)像表位,一種是線性表位。構(gòu)象表位意思就是蛋白的三維結(jié)構(gòu),而線性表位就是蛋白的序列一級結(jié)構(gòu)。T細胞只需要識別線性表位就成接受免疫呈遞細胞給出的信號,引發(fā)免疫反應。所以滅活的病毒具有抗原性,但失去感染力。這個其實是很多疫苗的制造原理。滅活的病毒失去感染活性,但仍有融合活性。用于動物細胞工程中的細胞融合的誘導劑。
    梅州病毒滅活效果實驗報告
    病毒培育與滅活實驗:
    1、實驗材料:
    實驗用病毒株,宿主細胞,細胞培養(yǎng)瓶與 96 孔培養(yǎng)板,恒溫水 浴箱,二氧化碳培養(yǎng)箱,層流超凈工作臺,-80℃低溫箱,二氧化碳培養(yǎng)箱,液氮,離心設備,移液器,細胞維持培養(yǎng)基,細胞完全培養(yǎng)基,去離子水等。
    2、實驗過程:
    病毒懸液制備:實驗組,陽性對照組,陰性對照組。病毒培育需每日觀察細胞與宿主細胞生長情況,接種細胞,病變收獲病毒, 每組按照特定條件設置病毒滅殺實驗驗證,并每組進行噬斑病毒感染滴度測定。平均滅活對數(shù)值計算,評價。
    梅州病毒滅活效果實驗報告
    病毒滅活的機理有三:
    1、破壞包膜:
    包膜含有脂類物質(zhì),因之有包膜的病毒可迅速被脂溶劑破壞,如、氯仿或去氧膽酸鈉可使病毒滅活。實際上可利用病毒對脂溶劑的敏感性來檢查病毒是否有包膜。物理因子,如滲透壓改變、凍融、熱和干燥等都可引起包膜破壞。一般認為,呼吸道感染的病毒對于燥抵抗力弱,傳播主要是人間直接感染,這是因為有包膜的原故。
    2、病毒蛋白質(zhì)變性:
    能使蛋白質(zhì)變性的化學制劑都能使病毒滅活,如酚、次氯化物、酸和堿等。加熱引起變性也是有效滅活的方法。一般說病毒對熱抵抗力弱,60°C幾分鐘就使之感染性明顯降低,因此在分離病毒時,從患者取來的標本需低溫保存,迅速送往實驗室,長期保存置于-80°C以下的低溫條件。
    3、病毒核酸的損害:
    y線等電離可切斷核酸,紫外線可使核苷酸鏈上相鄰的嘧啶堿基形成二聚物,而破壞病毒基因的功能。另外吖啶橙或中性紅等染料可與病毒核酸結(jié)合,暴露于光線之下,可使核酸分解,而使病莓滅活。
    梅州病毒滅活效果實驗報告
    病毒滅活效果測試:
    主要適用于消毒產(chǎn)品鑒定或日常監(jiān)測。用具有一定代表性的、活的病毒及其細胞感染技術,評價各種用途的消毒因子對測試病毒的殺滅效果。
    試驗器材:
    (1)試驗用病毒株:脊髓灰質(zhì)炎病毒1型(poliovirus- I,PV-I )株;艾滋病病毒1型(HIV-1)美國株。
    (2)宿主細胞:可采用VERO細胞系、BGM細胞、Hela細胞系或FL細胞系,作為PV-1的測試細胞。用含有人T淋巴細胞白血病病毒1型(human T cell leukemiavirus 1, HTLV-1) 基因的人淋巴細胞(株)作為HIV-1的測試細胞。
    (3)細胞培養(yǎng)瓶與96孔培養(yǎng)板。
    (4)恒溫水浴箱等。
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